液滴封裝在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用
1. 基于微流控液滴封裝技術(shù)的高通量篩選
高通量篩選是一種在短時間內(nèi)分析大量化合物庫的方法,例如,每天進行104到105次測試。通過借助機器人和多孔板,高通量篩選已被廣泛應(yīng)用于發(fā)現(xiàn)藥物、測試毒性和分析抗體的親和力。微流控液滴技術(shù)可以產(chǎn)生大量,反應(yīng)條件均一的單分散液滴,特別適合于提高高通量篩選。同時,由于微液滴的反應(yīng)體積在納升和皮升級,極大減少了試劑消耗。液滴的產(chǎn)生頻率可高達10kHz,滿足每天高達1億反應(yīng)條件的高通量篩選。
對比傳統(tǒng)方式,微流控液滴技術(shù)在高通量篩選中的優(yōu)勢
2.微流控液滴封裝技術(shù)在單細胞分析的應(yīng)用
隨著微流控液滴技術(shù)的發(fā)展,生物學(xué)家能夠通過液滴技術(shù)來分析單細胞的蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué),從而研究細胞群體中的異質(zhì)性。
在單細胞蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,細胞被限制在一個非常小的體積內(nèi),這使得大多數(shù)生物標記物幾乎都可以被檢測到。在微液滴內(nèi)無論是通過細胞分泌還是細胞裂解,目標檢測分子通常是通過熒光標記抗體來完成檢測的,結(jié)果一般記錄為“0或1”,這種分析技術(shù)我們稱之為數(shù)字微流控分析技術(shù)。數(shù)字微流控分析可以使許多檢測結(jié)果進行定量,使微液滴技術(shù)具有更廣闊的應(yīng)用前景。
單細胞基因組學(xué)可以通過單細胞微液滴技術(shù),利用引物功能化的微球來靶向DNA。因此,可以通過微流控液滴技術(shù)來繪制整個細胞亞群的基因組圖譜。在這一應(yīng)用中,有一個常用的RNA測序技術(shù),稱為Drop-seq(液滴測序技術(shù)),是目前在這個領(lǐng)域少數(shù)幾個商業(yè)開發(fā)的應(yīng)用之一。
3. 基于液滴封裝技術(shù)的高通量蛋白質(zhì)定向演化
定向演化是一種通過體外模擬自然選擇來限制和加速蛋白質(zhì)進化的過程。主要應(yīng)用于工業(yè)用酶的篩選和微調(diào)。微流控液滴技術(shù)具有的微型化、控制改進、同質(zhì)性和分選等優(yōu)勢,使研究人員能夠開發(fā)出超高通量的蛋白質(zhì)定向演化(每天超過106種化合物)。這些系統(tǒng)能夠在一天內(nèi)篩選出108種蛋白質(zhì),明顯超過傳統(tǒng)方法(在常規(guī)的平板實驗中,需要兩周才能篩選出2000種蛋白)。
4. 基于微流控液滴封裝技術(shù)的藥物輸送系統(tǒng)
除了作為微反應(yīng)器外,液滴還可以轉(zhuǎn)化為藥物輸送系統(tǒng)(DDS)。液滴封裝技術(shù)與上述的方法類似,即將稀釋的藥物作為分散相,可以通過控制液滴形成的流速來控制液滴內(nèi)的藥物濃度。然而,根據(jù)給藥途徑的不同,液滴可能需要通過固化步驟變成微米顆粒/納米顆粒。此外,一些基于液滴的藥物傳遞系統(tǒng)可能需要使其溶液功能化,以響應(yīng)特定的pH值或溫度,作為輸送控制系統(tǒng)。
5. 液滴可以作為人造細胞的模板
液滴可以作為人工細胞的模板。根據(jù)不同的研究目的,它們可以通過無膜隔離的生化反應(yīng)模擬特定細胞功能,或者可以用作脂質(zhì)雙分子層的模板。更復(fù)雜的設(shè)計允許將液滴封裝在更大的液滴中,以模擬真實細胞中的組成,并提供更好的反應(yīng)時間控制,因為在液滴形成之前,試劑并不都在分散相中混合。
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