微流控芯片在ctDNA和CTC中的應(yīng)用
相比傳統(tǒng)腫瘤手術(shù)、創(chuàng)傷的檢測(cè)方式,液態(tài)活檢無(wú)創(chuàng)便捷,并且可以實(shí)時(shí)進(jìn)行監(jiān)測(cè),使其成為國(guó)際研究領(lǐng)域及臨床領(lǐng)域關(guān)注的重點(diǎn)。如今發(fā)展較為成熟的技術(shù)是ctDNA和CTC。
ctDNA:
ctDNA是腫瘤患者血液中游離的來(lái)自腫瘤的DNA(circulating tumor DNA,ctDNA),因?yàn)榛赾tDNA檢測(cè)的液態(tài)活檢進(jìn)入MIT評(píng)選的2015年十大突破技術(shù),因而廣受關(guān)注。
ctDNA常用數(shù)字PCR進(jìn)行研究,其對(duì)微量DNA的檢測(cè),包括微量的突變有廣泛的應(yīng)用前景,是目前發(fā)展的一個(gè)重要方向。如今數(shù)字PCR可以分為兩類(lèi),一個(gè)液滴類(lèi)的數(shù)字PCR,還有一個(gè)是微流控?cái)?shù)字PCR。
微流控芯片數(shù)字PCR采用微流控芯片,將PCR反應(yīng)液分割成數(shù)量眾多且體積相等的反應(yīng)單元,通過(guò)檢測(cè)擴(kuò)增后熒光信號(hào)呈陽(yáng)性的反應(yīng)單元的數(shù)量對(duì)核酸模板進(jìn)行定量,具有可絕對(duì)定量、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。在感染性疾病診斷、腫瘤早期診斷、產(chǎn)前診斷等多個(gè)領(lǐng)域顯示出巨大的應(yīng)用前景。
數(shù)字PCR ctDNA檢測(cè)的應(yīng)用主要是檢測(cè)稀有突變和拷貝數(shù)變異分析,在基因表達(dá)分析以及甲基化位點(diǎn)分析可以準(zhǔn)備實(shí)現(xiàn)。其對(duì)用量使用,試劑的使用,分析,后期非常好的操作性和便捷性。但在通量性等方面還需要繼續(xù)提升。
CTC:
循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC,CirculatingTumorCell)是存在于外周血中的各類(lèi)腫瘤細(xì)胞的統(tǒng)稱(chēng),因自發(fā)或診療操作從實(shí)體腫瘤病灶(原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶)脫落,大部分CTC在進(jìn)入外周血后發(fā)生凋亡或被吞噬,少數(shù)能夠逃逸并錨著發(fā)展成為轉(zhuǎn)移灶,增加惡性腫瘤患者死亡風(fēng)險(xiǎn)。CTC檢測(cè)通過(guò)捕捉檢測(cè)外周血中痕量存在的CTC,監(jiān)測(cè)CTC類(lèi)型和數(shù)量變化的趨勢(shì),以便實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估治療效果,實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)個(gè)體治療。
循環(huán)腫瘤CTC相比ctDNA有自己的優(yōu)勢(shì),微流控在該領(lǐng)域也有非常重要的作用,由于微流控芯片管道尺寸在微米量級(jí)和細(xì)胞尺寸匹配,非常適合應(yīng)用于細(xì)胞分選,近些年來(lái),有越來(lái)越多的研究者將該技術(shù)應(yīng)用在CTCs的分選上。大家都知道,CTC在血液中非常稀少,如何實(shí)現(xiàn)CTC的捕獲是關(guān)鍵。如今CTC捕獲有三個(gè)關(guān)鍵技術(shù)瓶頸需要突破。
1、有效提高捕獲率;
2、實(shí)現(xiàn)較高細(xì)胞純度,保持完整細(xì)胞活性。
3、提升通量,包括樣本數(shù)量處理能力和樣本體積的處理能力。
標(biāo)簽:   微流控芯片 液態(tài)活檢 CTC