超聲波用于測量纖毛細(xì)胞的運(yùn)動
由McKelvey工程學(xué)院機(jī)械工程和材料科學(xué)助理教授J. Mark Meacham領(lǐng)導(dǎo)的跨學(xué)科團(tuán)隊和他實驗室的學(xué)生使用聲學(xué)微流體方法,在一個充滿液體的小室內(nèi)使用超聲波駐波來收集組單細(xì)胞綠藻細(xì)胞Chlamydomonas reinhardtii,一種用于研究人類纖毛的模式生物。所謂的聲阱利用細(xì)胞體的材料特性將它們固定在適當(dāng)?shù)奈恢枚粫p壞它們。通過首先收集細(xì)胞,該團(tuán)隊可以在幾分鐘內(nèi)有效地分析數(shù)百個細(xì)胞。結(jié)果發(fā)表在2019年6月12日的印刷版“ Soft Matter ”雜志的封底內(nèi)頁上。
“把它想象成一個由超聲場制成的小籠子,”米查姆說?!凹?xì)胞正在試圖找到逃生的方法,但被構(gòu)成籠壁的波浪推回。當(dāng)墻壁被移除時,它們可以自由奔跑?!?/span>
纖毛是細(xì)胞中的微小毛發(fā)狀結(jié)構(gòu),排列在我們的肺部,鼻部,大腦和生殖系統(tǒng)中。它們旨在清除液體和微生物,使人們保持健康。當(dāng)他們出現(xiàn)故障時,不孕癥,慢性中耳感染,大腦水和其他疾病都會發(fā)展。
Susan Dutcher 是醫(yī)學(xué)院的遺傳學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)和生理學(xué)教授,也是該論文的共同作者,他與C. reinhardtii及其數(shù)百種遺傳變異體或突變體一起研究纖毛行為和功能障礙。Meacham說,使用當(dāng)前方法分析這么多變種,手動追蹤單個細(xì)胞,需要很長時間。
“對于Dutcher博士來說,根據(jù)游泳的有效性快速對其細(xì)胞進(jìn)行分類,并選擇那些最費力,繁瑣,詳細(xì)分析最感興趣的細(xì)胞是有用的,”Meacham說?!斑@就是這種基于種群的方法真正有用的方法,使我們能夠在短時間內(nèi)分析大量給定的突變體?!?/span>
對于這項工作,該團(tuán)隊使用來自Dutcher實驗室的三種遺傳變異的C. reinhardtii細(xì)胞作為模型。
Meacham和博士生,該論文的第一作者M(jìn)inji Kim開發(fā)了微流控芯片,該芯片足夠小,其中兩個適合1英寸×3英寸的載玻片。細(xì)胞通過入口和出口通道進(jìn)入和離開,入口和出口通道連接到裝置中心的圓形腔室 - 就像在打開超聲波之前用于細(xì)胞的大而開放的固定筆。Kim和Meacham將含有細(xì)胞的液體插入裝置中,然后通過壓電傳感器激活超聲波。超聲波從室壁反射以在圓形室內(nèi)產(chǎn)生壓力井,其將細(xì)胞捕獲在室的中心處的組中。
在對細(xì)胞進(jìn)行成像后,研究人員關(guān)閉超聲波,有效地打開籠門,讓細(xì)胞游離。
“這個聲學(xué)陷阱使我們能夠進(jìn)行這種有趣的分析,我們無法做任何其他方式,”Meacham說?!拔覀兛梢圆东@并釋放細(xì)胞群,進(jìn)行分析,加載下一個群體,捕獲,釋放,分析并加載下一個細(xì)胞,每個樣本在幾十秒到一分鐘內(nèi)進(jìn)行分級測量不同細(xì)胞類型的能力?!?/span>
Meacham說,分析傳播細(xì)胞很容易自動化,因為游泳從一個地方開始。細(xì)胞在釋放的細(xì)胞的連續(xù)圖像中顯示為黑色像素。然后,細(xì)胞形狀的變化與游泳速度有關(guān)。
“我們觀察他們游泳一到三秒,然后一旦我們擁有這些圖像,分析它們的過程就是自動化的,”Kim說?!拔覀兛梢酝ㄟ^自動化方式從大約50個細(xì)胞中獲得運(yùn)動測量,這比通過跟蹤單個細(xì)胞要快得多。”
最終,該團(tuán)隊尋求為研究人員提供一種工具,根據(jù)其運(yùn)動能力對細(xì)胞進(jìn)行分類,無論是對C. reinhardtii突變體進(jìn)行編目還是用于評估精子細(xì)胞運(yùn)動,Meacham說。
原文鏈接:
https://source.wustl.edu/2019/06/ultrasound-used-to-measure-movement-of-ciliated-cells/
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