基于免疫親和力的微流控界面實(shí)現(xiàn)黑色素瘤血液標(biāo)本中CTCs和腫瘤外切體的雙重分離
黑色素瘤是最具侵襲性的癌癥之一,其發(fā)病率還在持續(xù)增長(zhǎng)。由于缺乏有前景的檢測(cè)標(biāo)記物,黑色素瘤的早期檢測(cè)受到阻礙。像其他癌癥類型一樣,黑色素瘤的存活率在很大程度上取決于其發(fā)現(xiàn)的階段。在早期階段,有89%的患者可以存活。但是,在轉(zhuǎn)移病例中,5年生存率顯著下降至5-19%。
早期診斷的一個(gè)主要問題是缺乏生物標(biāo)志物以及濃度很低。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)和癌癥來源的外來體是液體活檢中最重要的生物標(biāo)志物之一。液體活檢的最新進(jìn)展為癌癥的診斷和監(jiān)測(cè)提供了非侵入性的替代方案。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)和腫瘤外泌體由于其與癌癥相關(guān)的分子標(biāo)記和特征而逐漸成為有前景的生物標(biāo)志物。
最近發(fā)表在《先進(jìn)科學(xué)雜志》上的標(biāo)題為“Dual‐Isolation and Profiling of Circulating Tumor Cells and Cancer Exosomes from Blood Samples with Melanoma Using Immunoaffinity‐Based Microfluidic Interfaces”的文章重點(diǎn)。然而,使用單一樣本提供CTC和外泌體雙重分離的技術(shù)尚未徹底開發(fā)。有鑒于此,密歇根大學(xué)Sunitha Nagrath、 Scott A. McLean等研究人員在利用微流體同時(shí)檢測(cè)四氯化碳方面和低濃度的外泌體的工作,將可雙重利用的OncoBean(DUO)設(shè)備與黑色素瘤特異性抗體、MCAM和MCSP結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了CTC和外泌體的同時(shí)分離。
本文要點(diǎn):
1)利用患者的血樣,從單個(gè)樣本中特異性地分離出CTC和外切體,然后進(jìn)行分子圖譜分析,以進(jìn)行全面的研究。
2)黑色素瘤患者每毫升血樣中含有0-17 CTCS 和299 μg外體蛋白,而健康獻(xiàn)血者則不到2 CTCs和75.6 μg。
3)利用多重qRT-PCR檢測(cè)96個(gè)基因板的表達(dá)模式,也證明了這兩個(gè)標(biāo)記物都表達(dá)黑色素瘤相關(guān)基因。
綜上所述,雙重分離和分子表征可完成對(duì)黑色素瘤的進(jìn)一步研究,以鑒定出可行標(biāo)記物用于疾病進(jìn)展和治療效果的確定。
圖1.通過雙重利用OncoBean(DUO)微流控設(shè)備雙重隔離循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)和癌癥外泌體:a)從黑素瘤患者血液樣本中雙重隔離CTC和外泌體的示意圖;b)制成的DUO微流體裝置的尺寸;c)具有兩種不同黑素瘤抗體及其組合的黑素瘤癌細(xì)胞的相對(duì)分離性能。
文獻(xiàn)鏈接:
https://doi.org/10.1002/advs.202001581