實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意的5大細(xì)節(jié)
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實(shí)驗(yàn)的成功率很重要，而要提高成功率，就必須注意細(xì)節(jié)。以下是做實(shí)驗(yàn)需要注意的五大細(xì)節(jié)：
一，記錄
人的記憶力是有限的，在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，不可能記住做過的每一步。例如實(shí)驗(yàn)記錄如果不及時(shí)寫，第二天就會(huì)忘記很多，一周之后就完全忘記了。所以做實(shí)驗(yàn)一定要做好實(shí)驗(yàn)記錄。記錄一要及時(shí)，否則就會(huì)忘記，最好是隨時(shí)記錄。二要詳細(xì)，因?yàn)橐粋€(gè)很小的細(xì)節(jié)可能就是實(shí)驗(yàn)失敗或者成功的原因，如果沒有記下這個(gè)細(xì)節(jié)，實(shí)驗(yàn)出問題了就難以找到原因。例如，做實(shí)驗(yàn)用的試劑是哪一瓶，什么時(shí)候配的（尤其是容易失效的試劑），如果是用PBST配的5%BSA，加了0.02%的Sodium Azide抑制微生物生長，就應(yīng)該記錄為5%BSA.PBST.N3Na，而不是5%BSA。三要整潔，如果過于潦草，看起來很不方便，需要找相關(guān)信息的時(shí)候就難以找到。配好的試劑做好標(biāo)簽也是一種記錄，標(biāo)簽一定要詳細(xì)：包括試劑名稱、配置日期、配置者及其它必要信息。在配試劑的時(shí)候，為了防止忘記貼標(biāo)簽的情況，應(yīng)該先貼標(biāo)簽，再加試劑。電子記錄有易于檢索的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)于某些重要信息，可以記錄到電子文檔（例如word文檔）里面。
二，核查
很多時(shí)候，我實(shí)驗(yàn)失敗的原因是沒有仔細(xì)核查，例如沒有核查果蠅的表型，沒有仔細(xì)檢查試劑的標(biāo)簽，沒有核查離心機(jī)的轉(zhuǎn)速，沒有檢查heat block的溫度等等。每一個(gè)小錯(cuò)誤都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，所以一定要養(yǎng)成仔細(xì)核查的習(xí)慣。具體來說，在加試劑的時(shí)候，一定要仔細(xì)核查標(biāo)簽（包括試劑名稱、配置日期），是否有沉淀，顏色是否改變等；使用儀器的時(shí)候，要核查設(shè)置，例如溫度、轉(zhuǎn)速、時(shí)間設(shè)置等；電泳的時(shí)候，要核查是否有氣泡冒出；使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的時(shí)候，要核查表型等。
三，分裝
諺語說：不要把所有雞蛋都放到同一個(gè)籃子里。同樣，在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，有時(shí)也不要把所有試劑都放到同一個(gè)容器里。分裝有很多好處。第一，保險(xiǎn)?？梢苑乐挂?yàn)槲廴?、變質(zhì)等原因損失全部試劑或者樣品。第二，容易混勻。結(jié)冰的試劑需要全部溶解然后vortex才可以混勻，如果很大體積，有時(shí)會(huì)等不及全部溶解就開始加樣，會(huì)導(dǎo)致濃度不均。一般溶液都是先溶解溶質(zhì)濃度高的，就像是結(jié)冰的汽水一邊融化一邊喝，一開始很甜，最后幾乎沒有甜味了，是因?yàn)樘欠莸拇嬖跁?huì)降低熔點(diǎn)，含糖量高的先溶解了。分裝后，每一管溶液量小，解凍時(shí)容易全部溶解。注意在分裝的時(shí)候一定要全部溶解并充分混勻。第三，延長保質(zhì)期。很多試劑都要低溫保存。如果不分裝，每次使用的時(shí)候都全部受熱一次，變質(zhì)就會(huì)很快。分裝之后，每次使用只有少量試劑受熱，其它的還可以繼續(xù)保持于低溫，可以延長使用壽命。抗體、體積較大的酶、熱不穩(wěn)定的其它試劑等最好分裝保存于-20度或者更低的溫度。
四，混勻
實(shí)驗(yàn)對(duì)很多試劑的用量都有明確要求。要保證實(shí)驗(yàn)的成功和可重復(fù)性，必須保證試劑用量一致。用量等于體積乘以濃度，如果溶液不混勻的話，濃度就會(huì)不同，即使加樣體積一樣，實(shí)際的量也可能不一樣。所以，一定要保證試劑是充分混勻。結(jié)冰的試劑，必須完全溶解才可以使用。容易沉淀的試劑，使用之前必須充分vortex后再快速離心一下才能使用。
五，備份
在《At the bench》一書里，作者說如果實(shí)驗(yàn)室發(fā)生起火等危急情況，首先應(yīng)該搶救的不是試劑，而是實(shí)驗(yàn)記錄。因?yàn)橛辛藢?shí)驗(yàn)記錄才可以完成論文。其實(shí)，為了防止實(shí)驗(yàn)記錄丟失的情況，可以把實(shí)驗(yàn)記錄掃描為PDF文檔以備份。同時(shí)，對(duì)于重要的研究數(shù)據(jù)，最好整理成電子文檔例如excel或word文檔，并且養(yǎng)成對(duì)自己的電腦文件定期備份的習(xí)慣。此外，質(zhì)粒、轉(zhuǎn)化后的細(xì)菌也需要備份。最好備份兩份以降低丟失的概率。
六，順序
有時(shí)候需要給很多試管加不同的試劑。這么多試管和試劑，一不小心，就會(huì)忘記哪一管或者哪一樣試劑加了沒有。即使是只有兩三個(gè)試管，我有時(shí)候加了一個(gè)樣品，忽然就忘記是加了哪一管了。如果是按字母或者數(shù)字順序加樣的話，在這種情況下，就會(huì)清楚是加了哪一管。
具體來說，給試管加樣的時(shí)候，按照試管的字母順序，數(shù)字順序排列。例如做同一個(gè)質(zhì)粒的酶切，用了四種酶，分別是XbaI，KpnI，BamHI，BsteII，就按照從左至右分別為BamHI，BsteII，KpnI， XbaI的順序排列。把要加的試劑寫在紙上，按照從上至下，從左至右的順序加樣。對(duì)于同一個(gè)試劑，加一管，就把試管往左、右或者上、下移動(dòng)一格。電泳時(shí)，不同的泳道順序?yàn)閙arker、control、實(shí)驗(yàn)組。如果有多個(gè)marker或者control，也按照字母或者順序排列。收集樣品時(shí)，按照先時(shí)間順序，后字母、數(shù)字順序排列樣品。
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